產(chǎn)品名稱(chēng):甘油三酯(TG)含量檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品型號(hào):BC0625
產(chǎn)品特點(diǎn):甘油三酯(TG)含量檢測(cè)試劑盒測(cè)定意義:TG是長(zhǎng)鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不僅是細(xì)胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。 測(cè)定原理:用異丙醇抽提取TG,KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸,過(guò)碘酸氧化甘油生成甲醛,在氯離子存在下甲醛與乙酰丙酮縮合生成黃色物質(zhì),在420 nm有特征吸收峰,其顏色的深淺與TG含量成正比。
免費(fèi)咨詢(xún):010-50973130
甘油三酯(TG)含量檢測(cè)試劑盒
操作步驟:
一、 TG 的提取:
1、 組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清待測(cè)。
2、 細(xì)胞、細(xì)菌:先收集 400-500 萬(wàn)細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,加 1mL 試劑一,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20%,超聲 2s,停 1s),8000g, 4℃離心 10min,取上清待測(cè)。
3、 血清(漿)等液體樣品:直接測(cè)定。
二、 測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 420 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 水浴鍋預(yù)熱到 65℃。空白管 標(biāo)準(zhǔn)管 測(cè)定管雙蒸水(μL) 40 標(biāo)準(zhǔn)液(μL) 40 TG 待測(cè)液(μL) 40 試劑一(μL) 125 125 125 試劑二(μL) 25 25 25 加試劑一后充分混勻,再加試劑二,劇烈振蕩 30s,靜置,待分層后取上層溶液 30μL,置于新的 EP 管中。
3.甘油三酯含量測(cè)定:空白管 標(biāo)準(zhǔn)管 測(cè)定管上層溶液(μL) 30 30 30 試劑三 (μL) 100 100 100 試劑四(μL) 30 30 30 充分混勻,65℃水浴 3min 試劑五(μL) 100 100 100 試劑六(μL) 100 100 100 充分混勻,65℃水浴 15min 取出 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板測(cè)定 420nm 處吸光度,記為 A 空,A 標(biāo)和 A 測(cè)。注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
甘油三酯(TG)含量檢測(cè)試劑盒
a.使用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
1. 血清(漿)中甘油三酯含量: TG 含量(mg/dL)=C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測(cè)-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)×100 mL =100×(A 測(cè)-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空) C 標(biāo)準(zhǔn)品:1mg/mL;100mL:血清體積,1dL=100 mL。
2. 組織中甘油三酯含量: (1)按樣本蛋白濃度計(jì)算 TG 含量(mg/ mg prot)= C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測(cè)-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷Cpr =(A 測(cè)-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷ Cpr (2)按樣本質(zhì)量計(jì)算 TG 含量(mg/ g)=C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測(cè)-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷W =(A 測(cè)-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷ W C 標(biāo)準(zhǔn)品:1mg/mL ;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g/mL
3. 細(xì)胞、細(xì)菌中甘油三酯含量: TG 含量(mg/104 cell)=C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測(cè)-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷細(xì)菌或細(xì)胞(104 cell /mL) =(A 測(cè)-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷細(xì)菌或細(xì)胞(104 cell /mL) C 標(biāo)準(zhǔn)品:1mg/mL。
b.使用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
1. 血清(漿)中甘油三酯含量: TG 含量(mg/dL)=C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測(cè)-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)×100 mL =100×(A 測(cè)-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空) C 標(biāo)準(zhǔn)品:1mg/mL;100mL:血清體積,1dL=100 mL。
2. 組織中甘油三酯含量: (1)按樣本蛋白濃度計(jì)算 TG 含量(mg/ mg prot)= C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測(cè)-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷Cpr =(A 測(cè)-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷ Cpr (2)按樣本質(zhì)量計(jì)算 TG 含量(mg/ g)=C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測(cè)-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷W =(A 測(cè)-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷ W C 標(biāo)準(zhǔn)品:1mg/mL ;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g/mL
3. 細(xì)胞、細(xì)菌中甘油三酯含量: TG 含量(mg/104 cell)=C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測(cè)-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷細(xì)菌或細(xì)胞(104 cell /mL) =(A 測(cè)-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷細(xì)菌或細(xì)胞(104 cell /mL) C 標(biāo)準(zhǔn)品:1mg/mL。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒中有易揮發(fā)性物質(zhì),實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需佩戴手套和口罩,試劑瓶蓋打開(kāi)后應(yīng)該及時(shí)蓋緊。
2. 加試劑二后需劇烈震蕩,使待測(cè)液中甘油三酯得到充分提取。
3. 檢出限為 100μ mol/L。
試劑一:自備,取玻璃空瓶,加入 45mL 正庚烷,80mL 異丙醇,蓋緊后混勻,4℃保存。
劑二:液體 3mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑五:液體 10mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4℃避光保存。標(biāo)準(zhǔn)品:液體 5mL×1 瓶,1mg/mL 甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)溶液,4℃保存。
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《Strontium ranelate-induced anti-adipocytic effects are involved in negative regulation of autophagy in rat bone marrow mesenchymal stem cells》 作者:Zhenbin Xu,Xizhuang Bai 期刊:International Orthopaedics 影響因子:2.384 PMID:29717341
《Correlations of chemokine CXCL16 and TNF-α with coronary atherosclerotic heart disease》 作者:Jieyong Xing Yanshao Liu Tao Chen 期刊:Experimental and Therapeutic Medicine 影響因子:1.448 PMID:29399085
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