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多酚氧化酶(PPO)活性檢測試劑盒

產品名稱：多酚氧化酶測定試劑盒 （可見光分光光度法）
產品英文名：Polyphenol Oxidase (PPO) Assay Kit
產品貨號：BC0190                          產地：北京市通州區馬駒橋聯東U谷8三樓
產品規格：50管/24樣                   產品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：520
庫存狀態：現貨                          
關鍵字：多酚氧化酶測定試劑盒 

簡要介紹：
PPO能夠催化鄰苯二酚產生醌，后者在525nm有特征光吸收。
PPO（EC1.10.3.1）主要存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是一種含銅的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化產生醌，從而引起褐化，與果蔬加工、茶葉品質和組培等密切相關。

產品詳細描述

商品貨號：	商品品牌：	規格	基本售價：	選擇規格
BC0190-50管/24樣	Solarbio	50管/24樣	520.00元

產品簡介： 
PPO 主要存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是一種含銅的氧化酶，能使一元酚和二元 酚氧化產生醌，從而引起褐化，與果蔬加工、茶葉品質和組培等密切相關。 PPO 能夠催化鄰苯二酚產生醌，后者在 410nm 有特征光吸收。

試驗中所需的儀器和試劑： 
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1ml 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

產品內容： 
提取液：液體，60ml×1 瓶，4℃保存，用前混勻；  
試劑一：液體，40ml×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體，10ml×1 瓶，4℃保存；

操作步驟：  
一、粗酶液提取：    
1. 收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照每 200 萬細菌或細胞加入 400μl 提取液，超 聲波破碎細菌或細胞（功率 20％，超聲 3 秒，間隔 10 秒，重復 30 次）；8000g 4℃離心 10 分鐘， 取上清，置冰上待測。
2. 稱取約 0.2g 組織，加入 1ml 提取液進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10 分鐘，取上清，置冰上待 測。

二、測定操作表：

冷卻后，5000g，常溫離心 10min，收集上清，用蒸餾水調零，410nm 處檢測測定管和對照管吸光度。
注意:每個測定管需要設置一個對照管,可以在不同對照管中加入不同樣品的粗酶液,然后集中進 行 1min 沸水浴處理

PPO活性計算：  
1、組織中 PPO 活力的計算:
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每分鐘每 mg 組織蛋白在每 ml 反應體系中使 410nm 處吸光值變化 0.01 定義為一個酶活力單位。
PPO（U/mg prot）= V 反總×V 樣總÷V 樣÷T÷0.01×（A 測定-A 對照）÷Cpr=60×（A 測定-A 對照）÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算：
單位的定義：每分鐘每 g 組織蛋白在每 ml 反應體系中使 410nm 處吸光值變化 0.01 定義為一個酶活 力單位。
PPO（U/g 鮮重）= V 反總×V 樣總÷V 樣÷T÷0.01×（A 測定-A 對照）÷W=60×（A 測定-A 對照）÷W
2、細菌或培養細胞中 PPO 活力的計算:
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每分鐘每 mg 組織蛋白在每 ml 反應體系中使 410nm 處吸光值變化 0.01 定義為一個酶 活力單位。
PPO（U/mg prot）= V 反總×V 樣總÷V 樣÷T÷0.01×（A 測定-A 對照）÷Cpr=60×（A 測定-A 對照）÷Cpr
（2）按細菌或細胞密度計算：
單位的定義：每分鐘每 1 萬個細菌或細胞在每 ml 反應體系中使 410nm 處吸光值變化 0.01 定義為一 個酶活力單位。
PPO（U/104 cell）= V 反總×V 樣總÷V 樣÷T÷0.01×（A 測定-A 對照）÷細菌或細胞密度（104/mL） =60× （A 測定-A 對照）÷細菌或細胞密度（104/mL） =60× （A 測定-A 對照）÷細菌或細胞密度（104/mL）
 V 反總：反應體系總體積，0.9mL；V 樣：加入反應體系中樣本體積，0.15 mL；V 樣總：加入提取 液體積，1 mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，0.2g.

注意事項：
不同樣本的多酚氧化酶的反應溫度略有差別，可在 25-37℃之間進行調節。

相關文獻：
《Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)》 作者:Beibei Li，Yang Ding，Xiuli Tang，Guoyi Wang，Shujuan Wu，Xianxian Li，Xiaofei Huang，Tongtong Qu，Jifeng Chen 期刊:Food and Bioprocess Technology 影響因子:3.032 PMID:
《MTA1 promotes the invasion and migration of pancreatic cancer cells potentially through the HIF-α/VEGF pathway》 作者:B Li, Y Ding, X Tang, G Wang, S Wu, X Li 期刊:Journal of Receptor and Signal Transduction Research. 影響因子:2.998 PMID:30396299

多酚氧化酶(PPO)活性檢測試劑盒