產(chǎn)品名稱:Solarbio重組牛腸激酶
產(chǎn)品型號(hào):EK0801-100
產(chǎn)品特點(diǎn):活力:≥10u/ul活性定義:1U定義為在25℃,12h-16h之內(nèi),將50ug保存于25mM Tris-HCl 8.0緩沖液中的融合蛋白切割達(dá)95%所需的酶量。分子量:理論MW:25,850DA來(lái)源:重組大腸桿菌產(chǎn)品性狀:液體儲(chǔ)存:-20℃
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索萊寶腸激酶是一種高純度的重組牛腸激酶。該酶經(jīng)HPLC純化,純度高,特異性高,并且不含其他蛋白酶。腸激酶(EC 3.4.21.9)是一個(gè)特定的蛋白酶,它可以切割前面含有四個(gè)天冬氨酸的賴氨酸羧基端位點(diǎn):天冬氨酸- 天冬氨酸- 天冬氨酸- 天冬氨酸-賴氨酸。腸激酶可去除位于蛋白質(zhì)N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合標(biāo)簽。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
高純度
高特異性
1)特定的蛋白酶,切割前面含有四個(gè)天冬氨酸的賴氨酸羧基端位點(diǎn):天冬氨酸- 天冬氨酸- 天冬氨酸- 天冬氨酸- 賴氨酸(DDDDK)
2)不含其他蛋白酶,無(wú)非特異性切割
酶切條件:
按照酶活性定義,重組EK酶切條件舉例:25mM Tris-HCl 8.0體系中:
融合蛋白濃度 0.1-1mg/ml (蛋白總量50-100μg)
重組EK用量 1-2U
溫 度 25℃
常見(jiàn)影響腸激酶活性的因素
在>200mM 咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切效果受影響。可參照以下推
薦方法進(jìn)行酶切:
1)為獲得理想酶切結(jié)果,請(qǐng)將樣品透析到25mM Tris-HCl 8.0緩沖液中,再進(jìn)行酶切。
2)若不便透析,可將樣品稀釋,咪唑含量在100mM以下,NaCl濃度在50mM以下,甘油濃度小于5%以下進(jìn)行酶切,酶的用量與蛋白的比例不變(即1U酶切50μg蛋白)。
3)如果樣品溶液中含有上述成分中的一種或多種,且不便去除,此時(shí)適當(dāng)增加酶量或延長(zhǎng)酶切時(shí)間,也可達(dá)到較好酶切效果。
產(chǎn)品用途
用于去除位于蛋白質(zhì)N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合標(biāo)簽
穩(wěn)定性:可以在常溫下運(yùn)輸,在25℃可穩(wěn)定保存一周,酶液可以反復(fù)凍融數(shù)次,對(duì)酶活無(wú)
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